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                細胞生物學之細胞克隆形成試驗
                • 來自:星辰生物
                • 發布時間:2020/7/16
                • 作者:Devon

                一、實驗原理

                      細胞克隆形成實驗是用來檢測細胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等的重要技術方法。細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。

                二、 實驗方法

                      包括平板克隆形成實驗和軟瓊脂克隆形成實驗。其中平板克隆形成實驗適用于貼壁生長的細胞;軟瓊脂克隆形成實驗適用于非錨著依賴性生長的細胞。

                      本次主要講解平板克隆形成實驗步驟。

                三、實驗步驟

                     1. 取對數生長期的細胞,制備細胞懸液。

                     2. 將細胞懸液作梯度倍數稀釋,分別接種含培養液的皿中,培養2-3周。

                     3. 經常觀察,當培養皿中出現肉眼可見的克隆時,終止培養。

                     4. 棄去上清液,4%多聚甲醛固定,GIMSA染色液染10-30 min。

                     5. 計算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆數/接種細胞數)× 100%。

                     6. 結果統計分析。

                四、實驗結果

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